研究方法

虽然使用超敏感循环肿瘤DNA（ctDNA）检测的微小残留病（MRD）在DLBCL一线免疫化疗后的预后价值已经得到证实，但其与CD19 CAR-T二线（2L）治疗后预后的相关性尚不清楚。III期TRANSFORM研究（NCT03575351）既往结果显示，在适合自体移植的原发难治/早期复发LBCL患者中，与标准治疗（SOC）相比，lisocabtagene maraleucel（liso-cell）在无事件生存（EFS）、CR率和PFS方面具有统计学意义和临床意义的改善。本次研究者报告了TRANSFORM研究中纵向检测ctDNA水平作为疾病负担的前瞻性测量指标，并阐述了ctDNA在应用liso-cel二线治疗的LBCL患者中的预测价值。

研究者对原始随机人群（n=184）中160例患者的551份血浆样本（liso-cel，n=79；SOC，n=81）通过PhasED-seq技术进行ctDNA盲法评估。肿瘤来源PV（Phased Variant）直接从筛查时采集的基线血浆样本中鉴定，不应用肿瘤组织；来源于外周血单核细胞的匹配DNA用于检测种系变异和克隆造血。

PV用于liso-cel回输当天、回输后第15天、第1、2、3、12个月ctDNA的纵向评估。SOC组仅评估治疗前样本。ctDNA水平基于基线特征、疗效（Lugano 2014标准）和EFS进行比较。当ctDNA水平超过检测阈值（≈1:106游离DNA分子），特异性为98%时，报告患者/样本存在可检测MRD（即阳性）。

研究结果

从liso-cel组和SOC组136/160例（85%）具有可评估治疗前样本的患者中鉴定出PV。治疗前ctDNA水平存在较大差异[中位（IQR）：136（35-696） hGE/mL]，并且与高风险疾病指标相关，包括分期（P=0.02）、年龄调整的国际预后指数（P<0.0001）、疾病负担（SPD；P<0.0001）和LDH水平（P<0.0001）。

liso-cel回输后，对63例患者进行连续ctDNA水平评估。回输后所有时间节点，实现ctDNA检测阴性与达到CR和更长EFS相关。第3个月达到CR患者，输注后ctDNA水平迅速下降，第15天17/34例（50%）患者ctDNA检测阴性。相反，第3个月PD患者中16/18例（89%）第15天时仍可检测到ctDNA，ctDNA清除率低。

这些结果显示，对于第3个月达到CR与出现PD的患者，早在回输后第15天就观察到ctDNA阴性的组间差异（P=0.006）。随着时间推移，第3个月达到CR患者的ctDNA清除率不断提高，liso-cel回输后第1、3和12个月，ctDNA阴性率分别为63%、74%和86%。此外，在配对时间节点，大部分（71%）通过PET/CT诊断为CR的患者检测不到ctDNA，这证实达到CR的患者也获得了持久的分子缓解。

在CR和ctDNA结果不一致病例的疗效评估中，残留ctDNA检测对于较短EFS具有显著预后作用，1个月时ctDNA阳性CR患者的EFS率为47%（15/32；P=0.011），3个月时为26%（9/34；P=0.025），12个月时为13%（4/31；P=0.003）。

研究结论

liso-cel回输后前3个月和输注后15天内实现ctDNA阴性与持续临床获益显著相关。相反，ctDNA阳性预示着无法通过影像学发现的复发风险。研究结果证明，ctDNA检测可作为疾病监测的生物标志物，并且在接受liso-cel治疗的LBCL患者中可作为临床获益的早期预测指标，具有潜在临床价值，可以指导并加速未来临床试验。