白细胞介素-11治疗慢性特发性血小板减少性紫癜的疗效观察
【摘要】  为了探讨慢性特发性血小板减少性紫癜（CITP）患者血清IL-11水平的动态变化及意义，研究重组人白细胞介素-11(rhIL-11) 对CITP的治疗作用，采用ELISA方法对CITP患者治疗前后血清IL-11含量进行动态测定，并将rhIL-11应用于CITP患者，剂量1.5 mg，皮下注射，每天1次，1疗程14天，治疗1-2疗程。结果表明： CITP患者血清IL-11水平明显高于正常对照组，且血清IL-11水平与CITP患者血小板数呈平行性升高；患者经2个疗程rhIL- 11治疗后，血小板数均有不同程度的升高。结论： CITP患者血清IL-11水平与患者的血小板数有一定的相关性，且rhIL-11对CITP有较好的治疗效果。 
【关键词】  血小板
    慢性特发性血小板减少性紫癜(CITP)为血液系统常见病，目前治疗以糖皮质激素为首选。但这种治疗需要长期进行且有毒副作用，而相当部分病例会反复发作。有关IL-11治疗CITP 的研究报道较少，为此我们检测了29例CITP患者共66份血清的IL-11水平，并使用rhIL-11治疗22例CITP患者，取得了较满意疗效，现报道如下。
材料和方法
病历资料
选择29例CITP患者，诊断符合张之南主编的《血液病诊断及疗效标准》［1］，其中男11例，女18例，年龄13-65岁，中位年龄36岁，平均年龄31.4岁，血小板相关抗体pAIgG值均升高，免疫球蛋白IgG降低14例，IgA降低7例，IgM降低4例；T细胞亚群CD4+降低16例，CD4+/CD8+降低13例。采用糖皮质激素为主的常规疗法，抽取治疗前(n=29)和治疗后血小板回升至〉100×109/L患者 (n=21) 及6个月后血小板仍〉100×109/L的患者(n=16)外周血5 ml，测血小板数，并收集血清共66份，置-80℃冰箱备检。正常对照者20名，为健康志愿者及献血员。另选经反复糖皮质激素治疗复发者22例，接受rhIL-11治疗，其中男7例，女15例，年龄
17-62岁，中位年龄33.7岁，平均年龄34.43岁。在上述22例中有14例用过长春新碱（VCR），2例为脾切后复发者，病程最长5年，最短4个月，治疗前血小板数量21±2.6 （8-36）×109/L。
血清IL-11水平的测定
采用常规ELISA法测定CITP患者血清IL-11水平（ELISA检测盒购自晶美公司），操作按说明书进行：先在96孔板每孔中加入测试液（RD1S）100 ml，再将检测样品和标准品（RD6N）按比例加入（100  μl/well），室温孵育2小时，加洗液400 ml洗涤4次，加IL-11聚合剂200  μl，室温孵育2小时，加底液200  μl，室温孵育30分钟，加终止液50  μl，分别在450 nm和470 nm读取OD值，绘制标准曲线并计算样品中的IL-11含量。
rhIL-11治疗方法
经实验证明，rhIL-11与天然的IL-11在体内外的生物学活性无差异。本组患者采用北京双鹭药业公司生产的rhIL-11（商品名：迈格尔），1.5毫克/支。用药剂量： 1.5 mg，每天皮下注射，14天为1疗程，所有患者均用足2疗程。
统计学处理
采用SPSS统计软件包中的配对t检验、χ2检验及单因素直线相关分析。所有数据用均数±标准差（x±SD）表示。
结 果
CITP患者血清IL-11和血中血小板水平
CITP患者血清的IL-11水平明显高于正常对照组。前者IL-11水平为328.78±72.4 pg/ml，而后者IL-11水平为60.24±23.14 pg/ml；但CITP患者的血小板数明显低于正常对照组，前者为（21±2.6 ）×109 /L，而后者为（262.8±46.2）×109 /L  （P〈001)。经治疗血小板升高至≥100×109/L后IL-11水平更明显升高，IL-11水平为516.45±129.72 pg/ml，血小板数为（128±31.7）×109L，（P〈0.01)，且治疗前后患者血清IL-11水平与患者外周血血小板数呈正相关（P=0.028），6个月后血小板仍≥100×109 /L的患者血清IL-11水平恢复至正常水平（66.46±20.32 pg/ml） (附表)。Table.  Levels of platelets  and IL-11 in blood serum of patients with CITP  and control（略）
rhIL-11的疗效
经2疗程治疗后，22例患者的血小板数均有不同程度的升高，升高幅度为（118.6±35.7）×109/L（P〈0.05)，其中13例治疗1疗程后血小板即升至正常，包括1例脾切除后复发者。
不良反应
所有患者对1.5 mg rhIL- 11有较好的耐受性。本组患者出现的不良反应有乏力、结膜充血、注射部位红肿、硬结等，其中多数在治疗过程中自行缓解或消失，少数不良反应停药后消失，未出现其他严重不良反应。
讨 论
ITP是一种与自身免疫有关的疾病，其发病机理主要与细胞免疫和体液免疫功能异常有关，T、B细胞的功能状态起关键作用。据报道，CITP患者外周血CD3+CD4+细胞明显减少，CD3+CD8+细胞百分率显著增高，CD4+ 及CD8+细胞数明显下降［2］，我们的临床结果正和文献资料一致。我们发现，CITP患者血清IL-11水平明显升高，当血小板升高时IL-11水平更明显升高，之后又下降，表明IL-11在血小板升高的整个过程中均起作用，故检测CITP患者血清IL-11水平有助于临床观察病情、判断疗效、估计预后。考虑ITP患者血小板降低通过某些机制反馈性引起IL-11的分泌，从而刺激巨核系代偿性增生。体内外研究已证实，rhIL-11是一种多效能细胞因子，可直接或协同TPO、IL-3刺激造血干细胞和巨核细胞增殖，诱导巨核细胞分化和成熟，促进巨核细胞和血小板生成，增加体内血小板计数并保持其功能［3］。本研究结果亦显示，rhIL- 11对复发难治的CITP治疗有效，且毒副作用轻微，显示了其治疗CITP的应用前景。CITP和多种自身免疫性疾病一样，都存在着Th1/Th2比例失调，而Th1/Th2两个不同的细胞亚群在该病的发生发展中起决定性作用［4］。rhIL-11抑制抗原特异性Th1分化增殖，减少众多细胞因子产生，减弱Th1自身免疫反应。本研究因随诊时间较短，因此rhIL-11治疗CITP的远期疗效还有待进一步探讨。